Descriptif des activités
MicroPICell a pour but de fournir les moyens humains, matériels, techniques mis à sa disposition, nécessaires à la réalisation des projets en histologie.
L'objectif est de proposer le plus large spectre de techniques afin de répondre au mieux et de manière adaptée aux attentes et aux besoins des équipes et des projets de recherche. Chaque expérience est fonction de la problématique exposée. La plateforme dispose de tous les matériels nécessaires à la préparation et à la coupe des échantillons, des automates pour le traitement des lames et des matériels d'imagerie pour l'analyse des résultats.
La plateforme peut aussi vous apporter de l'aide lors de vos mises au point de marquage anticorps en immunohistochimie ou immunofluorescence (simple et multi-marquages), dans l'élaboration de nouveaux protocoles, dans la mise au point ou l'amélioration de coloration...
Le service d’histologie de la plateforme réalise des prestations histologiques (produits) et met à disposition des utilisateurs formés certains équipements.
Réalisation des techniques histologiques
La plateforme prend en charge :
- Les échantillons fixés chimiquement, et vous propose la déshydratation dans l’automate de déshydratation, l’inclusion en bloc de paraffine grâce à la station d’enrobage , la coupe des échantillons grâce au microtome, et l’étalement des coupes (1 à plusieurs selon la taille de l’échantillon) sur différents types de lames selon les besoins.
- Les échantillons congelés et vous propose la coupe des échantillons grâce au cryostat et l’étalement des coupes (1 à plusieurs selon la taille de l’échantillon) sur différents types de lames selon la technique réalisée ensuite (coloration ou immunomarquages) et le type de tissus.
Colorations
Les colorations de coupes sur lames réalisées et validées sur la plateforme sont :
- HPS (Hématoxyline Phloxine Safran) : Visualisation de la structure du tissu, mise en évidence des noyaux, cytoplasme et fibres de collagène
- HE (Hématoxyline Eosine) : Visualisation de la structure du tissu, mise en évidence des noyaux, cytoplasme
- Bleu Alcian : Mise en évidence des mucines
- Picro Sirius : Mise en évidence du collagène
- Trichrome de Masson : Mise en évidence du collagène
- Oil Red O : Mise ne évidence des lipides (uniquement sur coupes congelées)
- PAS (Periodic Acide Schiff) : Mise en évidence des polysaccharides dans les tissus conjonctifs et le mucus)
- Rouge alizarin : Mise en évidence du calcium
Ces colorations sont réalisées avec l’automate de coloration ou manuellement. A la demande des utilisateurs, la plateforme peut mettre au point des techniques de coloration particulière.
Immunomarquages
la plateforme met au point et réalise des techniques d’immunomarquages sur coupe paraffinées ou congelées. Ces techniques peuvent être également réalisées en semi-autonomie par le demandeur (contacter le personnel de la plateforme pour plus de renseignements).
Il peut s’agir de techniques d’immunohistochimie, avec détection du (des) marqueur(s) à l’aide de chromogène(s), en simple ou multi-marquage(s) ou d’immunofluorescence, avec détection du (des) marqueur(s) à l’aide du fluorochrome(s), en simple ou multi-marquage(s)
Ces techniques sont réalisées dans un automate Impath 36 A. ou manuellement.
Déparaffinage/démasquage
La plateforme peut également vous proposer de réaliser le déparaffinage et le démasquage de vos coupes étalées sur lames silanisées, afin que vous puissiez réaliser vos immunomarquages dans votre laboratoire.
Tissue Micro Arrayer (TMA)
La plateforme dispose d’un système permettant de réaliser des TMA. Des zones d’intérêt déterminées à partir de lames colorées, sont prélevées sur plusieurs blocs donneurs, pour être collectées sur un bloc receveur (bloc vierge de paraffine).
Décalcification
Les petits échantillons osseux nécessitent d’être décalcifiés pour retirer le calcium des os et procéder à la coupe du bloc de paraffine dans lequel est inclus l’échantillon. L’échantillon est alors plongé dans un ou plusieurs (selon la taille de l’échantillon) bains de décalcifiant.
Mise à disposition d’équipements
La plateforme met à disposition des utilisateurs formés un microtome et un cryostat.
Les modalités de formation à l’utilisation en autonomie et de réservation sont indiquées dans les conditions d’utilisations de la charte de fonctionnement.